在Python中，!=和is not都是用于进行不等比较的操作符，但是它们之间存在一定的区别。
首先，!=用于比较两个对象是否不相等，当两个对象不相等时，返回True，反之返回False。这里的不相等仅仅表示两个对象的值不一样。例如：
a = 5
b = 7
if a != b:
print("a和b不相等")
输出结果为：a和b不相等
其次，is not用于比较两个对象是否不同，当两个对象不是同一个对象时，返回True，反之返回False。这里的不同指的是两个对象在内存中的地址不同。例如：
s1 = "hello"
s2 = "hello"
if s1 is not s2:
print("s1不是s2")
输出结果为：s1不是s2
可以注意到，在这个示例中，虽然s1和s2的值相等，但是它们并不是同一个对象，因为它们在内存中的地址是不同的。
要注意的是，对于较小的对象，如整数和短字符串，Python会尝试重新使用内存地址。因此，Python的对象模型会让is not操作符在这些情况下返回False。例如：
a = 1000
b = 1000
if a is not b:
print("a不是b")
输出结果为：a不是b
但是，对于较大的对象，如列表和字典，is not操作符通常会返回True，因为Python不会重新使用内存地址。例如：
list1 = [1, 2, 3]
list2 = [1, 2, 3]
if list1 is not list2:
print("list1不是list2")
输出结果为：list1不是list2
因此，在使用!=和is not操作符时，要考虑到比较的对象的类型和大小，以及它们在内存中的位置等因素。